Rad51-protein involveret i reparation og rekombination i S. cerevisiae er et RecA-lignende protein
RAD51-genet fra S. cerevisiae er involveret i mitotisk rekombination og reparation af DNA-beskadigelse og også i meiose. Vi viser, at rad51 null-mutanten akkumulerer meiose-specifikke dobbeltstrengede pauser (DSB’er) ved et rekombinationshotspot og reducerer dannelsen af fysiske rekombinanter. Rad51-protein viser strukturel lighed med RecA-protein, det bakterielle strengudvekslingsprotein. Desuden har vi fundet ud af, at Rad51-protein svarer til RecA i dets DNA-bindende egenskaber og binder direkte til Rad52-protein, hvilket også spiller en afgørende rolle i rekombination.
Disse resultater antyder, at Rad51-proteinet sandsynligvis sammen med Rad52-proteinet er involveret i et trin til at konvertere DSB’er til det næste mellemprodukt i rekombination. Rad51-protein er også homologt med et meiose-specifikt Dmc1-protein fra S. cerevisiae.
Rekombinant muse-OB-protein: bevis for et perifert sign, der forbinder fedme og centrale neurale netværk
Den nylige positionskloning af museob-genet og dets humane homologi har givet grundlaget for at undersøge den potentielle rolle, som ob-genproduktet spiller i kropsvægtregulering.
En biologisk aktiv kind af rekombinant OB-muse-protein blev overudtrykt og oprenset til næsten homogenitet fra et bakterielt ekspressionssystem. Perifer og central administration af mikrogramdoser af OB-protein reducerede fødeindtagelse og kropsvægt af ob / ob og diætinducerede overvægtige mus, males ikke hos db / db overvægtige mus. De adfærdsmæssige virkninger efter hjerneadministration antyder, at OB-protein kan virke direkte på neuronale netværk, der styrer fodring og energibalance.
Quadrivalent human papillomavirusvaccine: Anbefalinger fra det rådgivende udvalg for immuniseringspraksis (ACIP)
Disse anbefalinger repræsenterer den første erklæring fra den rådgivende komité for immuniseringspraksis (ACIP) om brugen af en quadrivalent human papillomavirus (HPV) vaccine, der er licenseret af den amerikanske fødevare- og lægemiddeladministration den 8. juni 2006. Denne rapport opsummerer epidemiologien af HPV og associerede sygdomme, beskriver den licenserede HPV-vaccine og giver anbefalinger til anvendelse til vaccination blandt kvinder i alderen 9-26 år i USA.
Genital HPV er den mest almindelige seksuelt overførte infektion i USA; anslået 6,2 millioner mennesker er nyligt smittet hvert år. Selvom størstedelen af infektioner ikke forårsager kliniske symptomer og er selvbegrænsede, kan vedvarende infektion med onkogene typer forårsage livmoderhalskræft hos kvinder.
HPV-infektion er også årsagen til kønsvorter og er forbundet med andre anogenitale kræftformer. Cervikal kræftfrekvens er faldet i USA på grund af udbredt brug af Papanicolaou-test, som kan opdage præcancerøse læsioner i livmoderhalsen, før de udvikler sig til kræft; ikke desto mindre vil der i løbet af 2007 blive diagnosticeret 11.100 nye tilfælde, og ca. 3.700 kvinder vil dø af livmoderhalskræft. I visse lande, hvor screening af livmoderhalskræft ikke er rutinemæssig, er livmoderhalskræft en almindelig kræft hos kvinder. Den licenserede HPV-vaccine består af HPV L1-proteinet, det største kapsidprotein fra HPV. Ekspression af L1-proteinet i gær ved hjælp af rekombinant DNA-teknologi producerer ikke-infektiøse viruslignende partikler (VLP), der ligner HPV-virioner.
Den kvadrivalente HPV-vaccine er en blanding af fireplace HPV-typespecifikke VLP’er fremstillet af L1-proteinerne fra HPV 6, 11, 16 og 18 kombineret med en aluminiumadjuvans. Kliniske forsøg indikerer, at vaccinen har høj effektivitet til forebyggelse af vedvarende HPV-infektion, livmoderhalskræftforløbere læsioner, vaginal og vulvar kræftforløberlæsioner og kønsvorter forårsaget af HPV kind 6, 11, 16 eller 18 blandt kvinder, der ikke allerede er blevet inficeret med den respektive HPV-type. Der findes ingen beviser for beskyttelse mod sygdom forårsaget af HPV-typer, som kvinder er inficeret med på tidspunktet for vaccinationen.
Kvinder inficeret med en eller flere vaccine-HPV-typer før vaccination ville imidlertid være beskyttet mod sygdom forårsaget af de andre vaccine-HPV-typer. Vaccinen administreres ved intramuskulær injektion, og den anbefalede tidsplan er en 3-dosis serie med den anden og tredje dosis administreret 2 og 6 måneder efter den første dosis.
Den anbefalede alder for vaccination af kvinder er 11-12 år. Vaccine kan administreres så ung som 9 år. Indhentningsvaccination anbefales til kvinder i alderen 13-26 år, der ikke tidligere er vaccineret. Vaccination er ikke en erstatning for rutinemæssig screening af livmoderhalskræft, og vaccinerede kvinder skal have screening for livmoderhalskræft som anbefalet.
Tetrahymena histonacetyltransferase A: en homolog til gær Gcn5p, der forbinder histonacetylering til genaktivering
Vi rapporterer kloning af en transkriptionsassocieret histonacetyltransferase kind A (HAT A). Dette Tetrahymena-enzym er slående homologt med gærproteinet Gcn5, en formodet transkriptionsadapter, og vi demonstrerer, at rekombinant Gcn5p besidder HAT-aktivitet. Både ciliatenzymet og Gcn5p indeholder potentielle rester af aktivt sted fundet i andre acetyltransferaser og et stærkt konserveret bromdomæne.
Tilstedeværelsen af dette domæne i nukleare A-HAT’er, males ikke i cytoplasmatiske B-type HAT’er, antyder en mekanisme, hvorved HAT A er rettet mod kromatin for at lette transkriptionel aktivering. Disse fund kaster lys over den biokemiske funktion af det evolutionært konserverede Gcn5p-Ada-kompleks, der direkte forbinder histonacetylering til genaktivering og indikerer, at histonacetylering er et målrettet fænomen.
XPV-genet (xeroderma pigmentosum variant) koder for human DNA-polymerase eta
Xeroderma pigmentosum variant (XP-V) er en arvelig lidelse, der er forbundet med øget forekomst af sollys-induceret hudkræft. I modsætning til andre xeroderma pigmentosumceller (tilhører grupperne XP-A til XP-G) udfører XP-V-celler normale nukleotid-excisionsreparationsprocesser, males er defekte i deres replikation af ultraviolet-beskadiget DNA.
Det har i nogen tid været mistanke om, at XPV-genet koder for et protein, der er involveret i trans-læsion-DNA-syntese, males genproduktet er aldrig blevet isoleret. Ved hjælp af et forbedret cellefrit assay til trans-læsion DNA-syntese har vi for nylig isoleret en DNA-polymerase fra HeLa-celler, der fortsætter replikering på beskadiget DNA ved at omgå ultraviolet-induceret thymindimerer i XP-V-celleekstrakter. Her viser vi, at denne polymerase er en human homolog af gær Rad30-proteinet, for nylig identificeret som DNA-polymerase eta.
Denne polymerase og gær Rad30 er medlemmer af en familie af skade-bypass-replikationsproteiner, der omfatter Escherichia coli-proteinerne UmuC og DinB og gær Rev1-proteinet. Vi fandt ud af, at alle undersøgte XP-V-celler bærer mutationer i deres DNA-polymerase eta-gen.
Rekombinant human DNA-polymerase eta korrigerer manglende evne til XP-V-celleekstrakter til at udføre DNA-replikation ved at omgå thymindimerer på beskadiget DNA. Tilsammen indikerer disse resultater, at DNA-polymerase eta kunne være XPV-genproduktet.
IL-17 i synovialvæsker fra patienter med reumatoid arthritis er en potent stimulator for osteoklastogenese
IL-17 er et nyligt opdaget T-celle-afledt cytokin, hvis rolle i osteoklastudvikling ikke er fuldt belyst. Behandling af samkulturer af musehæmopoietiske celler og primære osteoblaster med rekombinant humant IL-17 inducerede dannelsen af multinukleære celler, der opfyldte hovedkriterierne for osteoklaster, herunder tartratresistent syrephosphatase-aktivitet, calcitoninreceptorer og pitdannelse på tandskiver.
Direkte interaktion mellem osteoklastforfædre og osteoblaster var påkrævet for IL-17-induceret osteoklastogenese, som blev fuldstændigt hæmmet ved tilsætning af indomethacin eller NS398, en selektiv hæmmer af cyclooxgenase-2 (COX-2). Tilføjelse af IL-17 øget prostaglandin E2 (PGE2) syntese i samkulturer af knoglemarvsceller og osteoblaster og i enkeltkulturer af osteoblaster, males ikke i enkeltkulturer af knoglemarvsceller.
Derudover inducerede IL-17 dosisafhængigt ekspression af osteoklastdifferentieringsfaktor (ODF) mRNA i osteoblaster. ODF er et membranassocieret protein, der transducerer et (de) væsentlige sign (er) til osteoklastfødere til differentiering i osteoklaster. Osteoklastogeneseinhiberende faktor (OCIF), en lokkemiddelreceptor af ODF, inhiberede fuldstændigt IL-17-induceret osteoklastdifferentiering i cocultures. Niveauerne af IL-17 i synovialvæsker var signifikant højere hos patienter med leddegigt (RA) finish patienter med slidgigt (OA).
Anti-IL-17-antistof inhiberede signifikant osteoklastdannelse induceret af dyrkningsmedier af RA synovialvæv. Disse fund tyder på, at IL-17 først virker på osteoblaster, hvilket stimulerer både COX-2-afhængig PGE2-syntese og ODF-genekspression, hvilket igen inducerer differentiering af osteoklastfødere til modne osteoklaster, og at IL-17 er et afgørende cytokin for osteoklast. knogleresorption hos RA-patienter.
